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產品名稱:丙酮酸(PA)測定試劑盒 微量法

產品型號:BC2205

產品報價:

產品特點:丙酮酸(PA)測定試劑盒 微量法
品牌:Solarbio | 貨號:BC2205
檢測方法 : 微量法
規格:100管/96樣

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BC2205丙酮酸(PA)測定試劑盒 微量法的詳細資料:

            丙酮酸(PA)測定試劑盒 微量法

測定意義:丙酮酸通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。

測定原理:丙酮酸與2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液中呈櫻紅色。

需要的儀器,耗材:可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 

              丙酮酸(PA)測定試劑盒 微量法

丙酮酸提取: 1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次),靜置 30min, 8000g,25℃離心 10min,取上清待測。 2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置 30min,8000g,25℃離心 10min,取上清待測。 3、血清(漿)樣品:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取 0.1mL 血清(漿)加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置 30min, 8000g,25℃離心 10min,取上清待測。

 

測定意義:丙酮酸通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。

測定原理:丙酮酸與2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液中呈櫻紅色。

需要的儀器,耗材:可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 

        

丙酮酸提取: 1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次),靜置 30min, 8000g,25℃離心 10min,取上清待測。 2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置 30min,8000g,25℃離心 10min,取上清待測。 3、血清(漿)樣品:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取 0.1mL 血清(漿)加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置 30min, 8000g,25℃離心 10min,取上清待測。

            

丙酮酸含量計算: a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下 1、標準條件下測定回歸方程為 y = 0.0466x + 0.0675; x 為丙酮酸鈉含量(µg/mL),y 為吸光值。 2、按照血清(漿)體積計算丙酮酸含量(μg/mL)= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V3×V1÷V2)=214.6×(A-0.0675) 3、按照蛋白濃度計算丙酮酸含量(μg/mg prot)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46×(A-0.0675) ÷Cpr 4、按照樣品質量計算丙酮酸含量(µg/g 鮮重)= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W ×V1÷V2)=21.46×(A-0.0675) ÷W 3、按照細菌或細胞密度計算丙酮酸含量(μg/104 cell)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(500×V1÷V2)=0.043×(A-0.0675)

 

測定意義:丙酮酸通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。

測定原理:丙酮酸與2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液中呈櫻紅色。

需要的儀器,耗材:可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 

 

丙酮酸提取: 1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次),靜置 30min, 8000g,25℃離心 10min,取上清待測。 2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置 30min,8000g,25℃離心 10min,取上清待測。 3、血清(漿)樣品:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取 0.1mL 血清(漿)加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置 30min, 8000g,25℃離心 10min,取上清待測。

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