產(chǎn)品名稱:細胞培養(yǎng)試劑人或各種動物血液及骨髓干細胞分離液
產(chǎn)品型號:
產(chǎn)品特點:細胞培養(yǎng)試劑人或各種動物血液及骨髓干細胞分離液本品為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是 Ficoll 400 與泛影酸葡甲胺。適用于從各種動物血液及骨髓中分離干細胞,在醫(yī)療和醫(yī)學生物學研究中廣泛應用。其他人及動物多種比重細胞分離液。
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細胞培養(yǎng)試劑人或各種動物血液及骨髓干細胞分離液
規(guī)格:200ml
保存:18℃-25℃避光保存,有效期 2 年。
本品為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是 Ficoll 400 與泛影酸葡甲胺。適用于從各種動物血液及骨髓中分離干細胞,在醫(yī)療和醫(yī)學生物學研究中廣泛應用。其他人及動物多種比重細胞分離液。注:因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數(shù)及細胞帶電不同,所以用戶在定制分離液時應提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細胞的名稱。
一、分離方法說明及圖例
A.Ⅰ. 取新鮮抗凝血液或臍帶血與淀粉 550 按 1:1 比例混合, 37℃反應 5-10 分鐘(5ml 以下樣本反應 5 分鐘,5ml 以上樣本反應 10 分鐘) ;取新鮮抗凝骨髓,加入一份細胞洗滌液,混勻后以 400g(約 1500 轉(zhuǎn)/分)離心 5 分鐘,棄去上清。沉淀與淀粉 550 按 1:1 比例混合,37℃反應 5-10 分鐘(5ml 以下樣本反應 5 分鐘,5ml 以上樣本反 應 10 分鐘) ;
B. 加入為步驟 A 中所得混合液 1/2 體積的全血及組織稀釋液混勻 20℃-30℃自然沉降 20-30 分鐘,吸取上清 吸取上清備用;
C. 向步驟 B 中所得上清液中加入為其一倍以上體積的細胞洗滌液混勻,以 500g(約 1800 轉(zhuǎn)/分)離心15 分鐘(半徑 15cm 水平轉(zhuǎn)子) ,棄去上清保留沉淀細胞;
D. 向細胞沉淀中加入全血及組織稀釋液調(diào)整細胞濃度為 2×10 8 —1×10 9 個/ml,小心疊加于細胞分離液之液面上(混合液:分離液=2:1) ;
E. 以 400g(約 1500 轉(zhuǎn)/分)離心 20 分鐘(半徑 15cm 水平轉(zhuǎn)子) ;
此時離心管中由上下細胞分四層。*層;為稀釋液層。第二層;為環(huán)狀乳白色含所需干細胞層。第三層;為透明分離液層。第四層;為極少紅細胞層。收集第二層細胞放入為其5-10倍體積的細胞洗滌液中,充分混勻后,以500g(約1800 轉(zhuǎn)/分)離心15分鐘。沉淀經(jīng)反復洗滌2 次即得所需干細胞。
F. 為獲得純度更高的干細胞,在步驟 E 中離心完成后可吸取第二層干細胞層再與淀粉 550按 1:1比例混勻,20℃-30℃自然沉降 20-30 分鐘,收集上清加入細胞洗滌液 500g(約 1800 轉(zhuǎn)/分)離心 15 分鐘。沉淀經(jīng)反復洗滌 2 次既得較高純度干細胞。(用戶可根據(jù)實際需要重復此操作步驟)
注:本方法提取率大于 80%,所提細胞不分化不轉(zhuǎn)化,對人體無害,可用于生物治療、細胞培養(yǎng)及分子生物學實驗等。
分離圖例:
二、 注意事項
A. 本分離液是敏光型的, 在運輸和貯藏過程中應在18℃-25℃避光保存, 啟封后置4℃保存避免微生物污染。另外,本品為真空包裝,未啟封前置于10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
B.待分離的樣本要求新鮮,避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一定在20℃水浴箱中復溫20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在20℃±2℃時分離效果好,且所有操作過程一定要在無菌條件下進行。
C.由于各品牌離心機的性能不同,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),調(diào)節(jié)離心的時間,摸索的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。
D.好使用無靜電反應的離心管,推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。
E.優(yōu)抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸、肝素。注意在血液稀釋過程中去除抗凝劑體積。
F.分離過程中所用其他試劑如:淀粉550、全血及組織稀釋液、細胞洗滌液及紅細胞裂解液等以我公司產(chǎn)品為優(yōu)選擇,本公司相關系列產(chǎn)品無菌、無病毒、無支原體、低內(nèi)毒素水平且無細胞毒性,所獲得的細胞可保持完好的生物活性和完整的細胞形態(tài)。
三、產(chǎn)品性能指標
pH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
內(nèi)毒素 ≤0.5EU/ml
無菌 直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下
四、貯藏及保存期限
18℃-25℃避光保存,有效期兩年。啟封后置4℃保存,有效期一周。
注:若保證無微生物污染,啟封后可置4℃長期保存。但應注意保存溫度較低時本分離液易
出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
細胞培養(yǎng)試劑人或各種動物血液及骨髓干細胞分離液訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。
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